Abstract:
Получена димерная форма РНКазы путем ковалентного связывания молекул мономера бифункциональным реагентом диметилсуберимидатом. По спектру кругового дихроизма определена вторичная структура РНКазы после димеризации. Содержание элементов вторичной структуры у димерной формы РНКазы изменяется по сравнению с мономером. У димера снижается содержание β-структур, в то время как количество α-спиральных участков остается неизменным. Показано, что уменьшение содержания β-структур в молекуле димера обусловлено частичным разворачиванием белковой глобулы РНКазы, которое является следствием щелочной денатурации фермента в процессе димеризации. Определение константы распределения мономерной и димерной форм РНКазы в двухфазной системе бутанол/вода показало, что у димерной формы РНКазы Bi имеет место увеличение гидрофобности. Рассмотрены особенности структуры димеризованной РНКазы с позиций перспектив усиления взаимодействия препарата с цитоплазматической мембраной клетки.
